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石蠟切片質(zhì)量控制
時間:2023-09-11 11:47
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(1)切片前首先裝好切片刀,把刀牢牢固定,否則,切片中就會發(fā)生許多人為現(xiàn)象。(最常見的人為現(xiàn)象是波紋,厚薄不均等)。
(2)蠟塊裝到切片機(jī)的蠟塊夾上,夾持要平穩(wěn)牢固。調(diào)整好蠟塊的方位,不能偏斜,刀刃與蠟塊的上、下緣平行。切片刀與蠟塊的平面之間應(yīng)保持一定的角度(清除角),一般為3~8度,以免刀刃面將組織刮壞。
(3)修蠟塊時要循序漸進(jìn),力爭修出最大面,又要防止小組織被修壞、修光。
(4)切片時連續(xù)轉(zhuǎn)動手輪,用力要平穩(wěn)、均勻。常規(guī)切片厚3~5μm。
(5)切下的蠟片相連成帶狀。待蠟帶切至一定長度時,右手用鑷子夾住蠟片末端,左手持毛筆輕輕將蠟帶的另一端與切片刀撥離。
(6)將蠟片較光滑的一面朝下置于溫水中(通常撈片水溫在42℃左右),并用鑷子幫助展開,去除皺紋后,選擇完整、無劃痕、厚薄均勻的蠟片,附貼到載玻片上。
(7)附貼時,務(wù)使蠟片與玻片之間無氣泡。玻片一端應(yīng)留有1/3的位置貼號碼標(biāo)簽用。將蠟片附貼在另外2/3的中心位置。
(8)切片放入62℃烤箱中約30~60分鐘烤片,以免發(fā)生脫片。為了防止脫片可以選用涂甘油蛋清片和掛膠片。比較常用的掛膠片有明膠片,APES膠片和多聚賴氨酸膠片等,免疫組化染色尤需要使用膠片。